همسانه سازی قسمت ایمنی زای اگزوتوکسین aاز سودوموناس آئروژینوزا و مطالعه اثر محافظتی آن به عنوان dna واکسن در برابر باکتری در موش

سودوموناس آئروژینوزا میکروارگانیسم فرصت طلبی است که به عامل اصلی عفونت های بیمارستانی در سراسر جهانی تبدیل گشته است. اگزوتوکسین a یک آنزیم خارج سلولی بوده که توسط اغب سویه های بالینی سودوموناس آئروژینوزا ترشح می گردد. اگر چه پاتوژنز بیماری های ناشی از سودوموناس پیجیده می باشد ولی شواهد کلینیکی و تجربی ارتباط دهنده اگزوتوکسین aبا موارد ابتلا و مرگ و میر ناشی از عفونت های سودوموناسی فراوان است. dna واکسن ها به عنوان تکنیکی در جهت محافظت ارگانیسم ها از بیماری بکار می روند. این واکسن ها در قالب dna های مهندسی ژنتیک شده ای هستند که منجر به ایجاد پاسخ های ایمنی می شوند. از آنجائیکه دومین انتقال دهنده و دومین 1b اگزوتوکسین a دارای خواص آنتی ژنیک هستند بنابراین می توانند در قالب کاندیدهای مناسبی در جهت محافظت از عفونت های سودوموناس بکار روند. در مطالعه حاضر یک قطعه ایمنی زای 490 جفت بازی شامل دومین انتقال دهنده و دومین 1b از اگزوتوکسین a سودوموناس آئروژینوزا سویه pao1 توسط pcr تکثیر داده شد. محصول pcr در ای کولای dh5a همسانه سازی گشت و در ای کولای bl21 با استفاده از پلاسمید بیانی pet28a و تحت کنترل پروموتور t7 بیان شد. برای مطالعه اثرات بیولوژیک و ایمونولوژیک پلاسمید نوترکیب، موش های balb/c توسط آن ها واکسینه شدند و پاسخ های هومورال حاصله عرض یابی شد. بعنوان نتیجه، پلی پپتید نوترکیب، وزن مولکولی kda18 در ژل sds–page داشت. آنالیز محل پلی پپتید نوترکیب در ای کولای نشان داد که پلی پپتید مذکور به فضای داخل سلولی باکتری تراوش می گردد. از آنجائیکه این پلی پپتید دارای خواص ایمونو ژنیک می باشد می تواند به عنوان واکسن موثری برعلیه عفونت های سودوموناسی بکار می رود. نتایج این تحقیق نشان داد که این واکسن منجر به تولید آنتی بادی های iga,igg ضدسودوموناس می گردد و محافظت مناسبی را در برابر باکتری ایجاد می نماید. بنابراین ایمنی تراپی با ژن کدکننده محصولات ایمونو ژنیک در پیش گیری از عفونت های سودوموناسی حائز اهمیت است.